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針對于PCR基因擴增實(shí)驗室，本文主要從PCR基因擴增實(shí)驗室名詞解釋?zhuān)琍CR基因擴增實(shí)驗室必須擁有的條件和PCR基因擴增實(shí)驗室建立辦法流程幾大方面概要說(shuō)明，具體更多相關(guān)技術(shù)知識務(wù)必關(guān)注我們的網(wǎng)站或者直接聯(lián)系我們艾普瑞。
PCR基因擴增實(shí)驗室名詞解釋?zhuān)篜CR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱(chēng)。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復制。通過(guò)DNA基因追蹤系統，能迅速掌握患者體內的病毒含量，其精確度高達納米級別，精確檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時(shí)判斷病人最適合使用哪類(lèi)抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。
基因擴增實(shí)驗又稱(chēng)PCR實(shí)驗，其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加，PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗的常規方法，廣泛應用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，例如：艾滋病檢測、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的檢測和診斷，DNA指紋、個(gè)體識別、親子鑒定及法醫物證，動(dòng)、植物檢疫，動(dòng)物及其衍生產(chǎn)品檢測，動(dòng)物飼料、化妝品、食品衛生檢測，轉基因作物與轉基因微生物檢測等。
一、PCR基因擴增實(shí)驗室必須擁有的條件：
1、必須在無(wú)菌無(wú)塵環(huán)境下進(jìn)行操作；
2、檢測人員必須通過(guò)國家臨檢中心業(yè)務(wù)培訓并取得合格證書(shū)；
3、必須通過(guò)國家臨床檢驗中心的驗收和認證；
4、檢測設備必須符合標準PCR熒光實(shí)驗室設置要求；
5、必須擁有標準的的PCR熒光實(shí)驗室；
二、PCR基因擴增實(shí)驗室建立辦法流程：
1、建立樣品準備區；
2、樣品準備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作，這樣增加了樣品之間污染的機會(huì )。為了避免這一問(wèn)題，反轉錄一步可以在樣品準備區進(jìn)行。在RNA-PCR中應用UNG以防止污染的方法也有報道；
3、建立前PCR區；
4、PCR實(shí)驗室試劑的操作；
5、在前PCR區建立PCR混合物；
6、控制污染的方法；
7、后PCR區PCR完成以后，需要分析樣品并解釋數據，應該留出一個(gè)專(zhuān)門(mén)用于反應后處理樣品的地方；
PCR實(shí)驗室布局
PCR實(shí)驗室原則上為試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產(chǎn)物分析區四個(gè)單獨的工作區域并設有專(zhuān)用走廊，各工作區域應設緩沖間，工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區應是分隔獨立的，各工作區有明顯的標志，不能直通，如果緊密相連，需安裝物品傳遞窗。前兩區為擴增前區，后兩區為擴增后區，擴增前區與擴增后區應嚴格分開(kāi)。實(shí)驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴增前區流向擴增后區，即從試劑準備區→樣品制備區→擴增區→擴增產(chǎn)物分析區，不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增后區，不得逆向流動(dòng)。各工作區頂部應安裝紫外燈，紫外燈的波長(cháng)為254nm，每20㎡一支40W的紫外燈。
驗室各區功能及主要設備
1、試劑準備區：主要進(jìn)行試劑的制備、分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區，不得經(jīng)過(guò)其它區域。試劑原材料必須貯存在本區內，并在本區內制備成所需的試劑。本區主要設備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。
對于氣流壓力的控制，本區并沒(méi)有嚴格的要求。
2、樣品制備區：主要進(jìn)行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。
本區的壓力梯度要求為：相對于鄰近區域為正壓，以避免從鄰近區進(jìn)入本區的氣溶膠污染。
3、擴增區：主要進(jìn)行DNA擴增。此外，已制備的DNA模板 (來(lái)自樣品制備區)的加入和主反應混合液(來(lái)自試劑準備區)制備成反應混合液等也可在本區內進(jìn)行。本區主要設備有：擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。
本區的壓力梯度要求為：相對于鄰近區域為負壓，以避免氣溶膠從本區漏出。
4、擴增產(chǎn)物分析區：擴增產(chǎn)物的測定。本區主要設備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等。
本區的壓力梯度的要求為：相對于鄰近區域為負壓，以避免擴增產(chǎn)物從本區擴散至其它區域。
PCR實(shí)驗室通風(fēng)系統及壓力控制
各區域之間應具備單向的實(shí)驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實(shí)驗之間的相互干擾，防止氣溶膠擴散對實(shí)驗過(guò)程造成污染。
PCR實(shí)驗室并沒(méi)有嚴格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗區域交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式，嚴格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗區的壓力要求。
PCR實(shí)驗室裝飾
實(shí)驗室圍護結構應牢固、氣密性好；所有陰陽(yáng)角宜采用圓弧過(guò)渡；墻體內壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒；地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹(shù)脂自流坪，材料應滿(mǎn)足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。五、PCR實(shí)驗室注意事項
1、幾個(gè)區域的大小設置情況，試劑準備區、擴增區、擴增產(chǎn)物分析區，空間可以相對小一些，樣品制備區要放置生物安全柜和低溫冰箱，空間應大一些。
2、試劑準備區、樣品制備區設緊急洗眼器，以保證操作人員的安全。
3、PCR實(shí)驗室沒(méi)有嚴格的凈化要求，可以根據用戶(hù)的使用情況和資金的投入選擇。
總之PCR基因擴增實(shí)驗室，從實(shí)驗室設計，實(shí)驗室規劃到都是技術(shù)含量比較高的系統工程，需要專(zhuān)業(yè)公司團隊開(kāi)展，否則無(wú)法達到理想效果，我們億金達在PCR基因擴增實(shí)驗室有著(zhù)豐富的實(shí)踐經(jīng)驗，如有需要做PCR基因擴增實(shí)驗室報價(jià)的，急切想知道自己企業(yè)需要做的PCR基因擴增實(shí)驗室價(jià)格，甚至需要免費PCR基因擴增
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